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摘要
Forkhead box家族蛋白（FoxO）在哺乳动物原始卵泡组装，卵母细胞凋亡和减数分裂的启动方面发挥着重要作用，但其家族成员在鳄类物种中的研究尚未见报道。本文以初孵扬子鳄性腺组织为实验材料，开展Forkhead box家族蛋白-1（FoxO1）基因CDS区克隆和序列特征分析，利用免疫组织化学检测其在胃、肠、肺脏等组织中的表达谱，结合免疫荧光（IF）、RT-PCR和Western blot探讨其在不同出壳后日龄（17日龄、63日龄、96日龄）雌性扬子鳄性腺组织中的时空表达规律，初步探讨其在雌性扬子鳄性腺发育过程中的生物学功能。本研究成功克隆获得FoxO1基因长度为1941 bp的完整编码区及646个预测编码氨基酸序列。与其他物种间进行同源性比对和构建进化树分析发现，扬子鳄Foxo1基因与鸟类的亲缘关系相较中华鳖和原矛头蝮等爬行动物更近。在其他脊柱动物中，哺乳动物、硬骨鱼和两栖物种也各自聚类称为子群，表明Foxo1兼具功能保守性和种间特异性；免疫组织化学结果表明FoxO1蛋白在初孵鳄性腺复合体、肺、胃、肠中均有表达，免疫荧光结果表明17日龄性腺组织中的FoxO1主要表达于肾上腺和中肾区但在皮质部呈微弱表达，在63日龄性腺皮质部表达逐渐上调且呈无规则随机分布，在96日龄性腺皮质部中卵母细胞发育程度更高的位置呈强表达；RT-PCR结果表明不同时期扬子鳄性腺组织FoxO1基因mRNA表达量差异不显著，Western blot结果显示性腺组织中的FoxO1表达量呈先上升后下降的变化模式，表现为63日龄FoxO1基因表达量显著高于17日龄和96日龄，相关结果对于丰富扬子鳄卵子发生调控机制提供了重要的研究参考。
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单位生命科学学院; 安徽师范大学
