摘要
目的:探讨参苓白术散(Shenling Baizhu San,SBS)对人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡的影响。方法:以化疗药奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)为阳性药,采用噻唑蓝[3-(4,5-dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT]比色法检测SBS联用L-OHP前后对HCT116细胞生长的抑制情况,碘化丙啶(PI)染色分析细胞周期分布,Annexin VFITC试剂盒检测HCT116细胞凋亡,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其对细胞内B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的影响。结果:(1)MTT比色法结果显示,分别取0.002,0.004,0.008,0.016,0.032,0.064,0.128 g·L-1L-OHP联用5%SBS药物血清作用于HCT116细胞48 h,与联用前各组比较,联用后各组细胞抑制率均明显上升(P<0.05),其中以0.064 g·L-1L-OHP联用5%SBS最高,达(94.95±0.90)%;(2)周期结果显示,与联用前L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)组比较,分别联用5%SBS后,G2/M期HCT116细胞分布增多,均由G0/G1,S和G2/M期转至G2/M期,以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最为明显(P<0.05);(3)凋亡结果显示,与联用前L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)组比较,分别联用5%SBS后均能明显增加HCT116细胞凋亡率(P<0.05),以高剂量联用组凋亡率最高,为(24.97±2.45)%;(4)蛋白检测显示,与5%空白血清组比较,L-OHP(0.002,0.004,0.008 g·L-1)分别联用5%SBS后,Bax蛋白表达量明显上调(P<0.05),以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最高。分别与空白血清组、空白组比较,各用药组Bcl-2蛋白表达量均明显降低(P<0.05),其中以L-OHP 0.008 g·L-1联用5%SBS组最低。结论:参苓白术散能协同L-OHP抑制人结肠癌HCT116细胞增殖及凋亡,其作用机制可能是通过促进HCT116细胞增殖、诱导细胞凋亡、改变细胞周期分布、上调Bax蛋白表达及下调Bcl-2蛋白表达来实现的。
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单位江西省中医病因生物学重点实验室; 江西中医药大学附属医院; 江西中医药大学中医基础理论分化发展研究中心