摘要

目的 探讨外泌体介导miR-3473b靶向NF-κB对肺癌细胞肺内转移及B细胞数量的影响。方法 提取小鼠肺癌细胞(LLC)外泌体,鉴定外泌体形态及标志物表达。将Cy5.5标记的LLC来源外泌体与成纤维细胞共培养,共聚焦显微镜观察外泌体行踪。RT-PCR检测细胞内及外泌体内miR-3473b表达。分析LLC来源外泌体对小鼠肺内转移及B细胞数量的影响。蛋白免疫印迹法LLC来源外泌体miR-3473b对肺成纤维细胞NF-κB通路的影响。结果 LLC来源外泌体微囊泡直径为30~100 nm,外泌体标记蛋白Hsp90、CD63呈阳性表达;LLC来源外泌体内miR-3473b表达水平显著高于细胞内(P<0.01);LLC来源外泌体组小鼠肺转移数目及面积显著多于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠肺转移数目及面积显著低于LLC来源外泌体组(P<0.05);LLC来源外泌体组小鼠肺内CD45+标记免疫细胞中B细胞百分比显著高于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠肺内CD45+标记免疫细胞中B细胞百分比显著低于LLC来源外泌体组(P<0.05);LLC来源外泌体组小鼠成纤维细胞p65和p-p65水平显著高于对照组,Nfkbid水平显著低于对照组(P<0.05);LLC来源外泌体+miR-3473b抑制剂组小鼠成纤维细胞p65和p-p65水平显著低于LLC来源外泌体组,Nfkbid水平显著高于对照组(P<0.05)。结论 外泌体介导miR-3473b可能通过抑制肺成纤维细胞Nfkbid表达,靶向激活NF-κB信号通路,促进肺癌细胞肺内转移以及诱导肺内B细胞聚集。

  • 单位
    驻马店市中心医院