MnCl2和MPP+诱导SK-N-SH细胞氧化应激及自噬的比较

作者：刘文丽; 窦长松; 王裕; 赵鹏; 傅娟玲; 姚碧云; 周宗灿

来源：中华劳动卫生职业病杂志, 2017, 35(02): 96-100.

• 锰
• 1-甲基-4-苯基吡啶
• 自噬
• 氧化应激
• SK-N-SH细胞

目的研究锰和1-甲基-4-苯基吡啶(MPP+)引起人神经母细胞瘤(SK-N-SH)细胞氧化应激和自噬的异同,进一步探讨锰神经毒性机制。方法以0.062 5、0.125、0.25、0.5、1.0和2.0mmol/L MnCl2和MPP+分别处理SK-N-SH细胞24 h,采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)试验检测细胞存活率;0.125、0.25、0.5 mmol/L MnCl2和MPP+分别处理细胞24 h,采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)含量,激光共聚焦显微镜观察细胞自噬体,蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测自噬相关蛋白P62和LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达。结果与对照组比较,0.062 52.0 mmol/L MnCl2和0.1252.0 mmol/L MPP+处理组SK-N-SH细胞存活率均明显降低,且0.252.0 mmol/L MnCl2处理组SK-N-SH细胞存活率明显低于相同剂量MPP+处理组(均P<0.05);与对照组比较,0.1250.25mmol/LMnCl2和0.1250.5mmol/L MPP+处理组SKN-SH细胞内ROS含量均明显增加,0.250.5 mmol/L MPP+处理组细胞内ROS含量明显高于相同剂量MnCl2处理组(均P<0.05);与对照组比较,0.250.5mmol/LMnCl2和MPP+处理组细胞自噬相关蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值均明显增加,P62表达均明显下降,且0.1250.5 mmol/L MPP+处理组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值明显高于相同剂量MnCl2处理组,0.125和0.25 mmol/L MPP+处理组P62表达水平明显低于相同剂量MnCl2处理组(均P<0.05)。结论 MnCl2和MPP+均可引起SK-N-SH细胞氧化应激,诱导自噬,且MPP+对SK-N-SH细胞自噬的诱导作用明显高于MnCl2。

• 单位
  公共卫生学院; 北京大学