黄芩苷对糖尿病肾病小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响

作者：尹青桥; 夏瑗瑜; 陈杰; 肖玲; 王优; 赵媛媛; 叶刚; 吴军

来源：中国现代医学杂志, 2020, 30(05): 8-13.

• 糖尿病肾病
• 黄芩苷
• 转录因子E2
• 抗氧化反应元件

目的研究黄芩苷对核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件(Nrf2-ARE)信号通路的影响,探讨黄芩苷对糖尿病肾病(DN)的治疗机制。方法 30只C57BL/6雄性小鼠随机分成空白对照组(对照组)、DN模型组(DN组)和黄芩苷干预组(干预组),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素复制DN模型并给予黄芩苷药物干预。ELISA法检测小鼠尿白蛋白。对肾小管上皮细胞进行分组:①高糖组:细胞在含25 mmol/L葡萄糖的高糖培养基中培养。②激活组:细胞在高糖组处理的基础上,用Nrf2激活剂NK-252(20μmol/ml)预处理肾小管上皮细胞24 h。③黄芩苷组:细胞在高糖组处理的基础上,用黄芩苷(100μmol/L)预处理肾小管上皮细胞24 h。④干扰对照组:高糖培养基中培养的细胞在加入黄芩苷的同时,通过Lipofectamine 2000对肾小管上皮细胞转染si-control(si-Nrf2的阴性对照),24 h后收集细胞。⑤Nrf2干扰组:高糖培养基中培养的细胞在加入黄芩苷的同时,通过Lipofectamine 2000对肾小管上皮细胞转染si-Nrf2(Nrf2的小干扰RNA),24 h后收集细胞。Western blotting检测Nrf2的表达水平,流式细胞仪检测肾小管上皮细胞凋亡状况。结果与DN组比较,干预组小鼠的尿白蛋白水平降低、Nrf2的表达水平升高、ARE的活性增强,差异均有统计学意义(P<0.05),且干预组小鼠的肾小管扩张变形程度减轻。细胞实验中发现,与高糖组比较,加入Nrf2激活剂或黄芩苷后,均能激活Nrf2,上调ARE活性,降低丙二醛(MDA)表达水平,并抑制肾小管上皮细胞凋亡(P <0.05)。同时,干扰Nrf2能逆转黄芩苷的作用,促进肾小管上皮细胞凋亡(P <0.05)。结论黄芩苷可能通过上调Nrf2-ARE信号通路抑制高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,发挥治疗DN的作用。

• 单位
  武汉市第三医院