HBD3基因真核表达质粒载体的构建及其体外表达和活性鉴定

作者：夏章权; 张从纪; 王涛

来源：重庆医学, 2012, (01): 51-53+57.

• β防御素
• 基因表达
• 间质干细胞
• 抗菌活性 beta-defensins
• gene expression
• mesenchymal stem cells
• antimicrobial activity

目的构建人β防御素3(HBD3)基因真核表达质粒载体,观察其在大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)中的表达,并检测其活性。方法利用RT-PCR方法从牙龈组织中扩增出HBD3基因片段,通过DNA重组技术将基因片段重组于pVIVO1-mcs真核表达质粒载体上,构建成pVIVO1-HBD3重组质粒载体,分别用酶切电泳分析及DNA测序的方法对重组质粒载体进行鉴定。运用jetPEI转染试剂将重组质粒转染BMSCs后,RT-PCR、免疫荧光和蛋白质印迹法检测目的基因的表达。取转染重组质粒的BMSCs无血清上清的浓缩液,采用K-B纸片扩散法进行抗菌活性实验。结果 (1)酶切电泳分析得到相应的目的片段,大小与理...

• 单位
  中国人民解放军陆军军医大学