一种新的乙型肝炎病毒全基因组克隆技术的建立

作者：李莉; 卢建溪; 谢冬英; 徐启桓; 朱明芬; 陈伟; 李刚

来源：热带医学杂志, 2006, 6(08): 868-870.

DOI：10.3969/j.issn.1672-3619.2006.08.005

• 肝炎病毒,乙型
• 基因组
• 聚合酶链反应

目的建立一种乙型肝炎病毒(HBV)全基因组扩增及克隆的新方法。方法设计含SalⅠ、NotⅠ酶切位点的引物,用一片段PCR法扩增HBV全基因组,经双酶切后将PCR产物克隆入pBlueScript-(SK-)载体,进行HBV全基因组序列测定。结果用此方法成功获得35例HBV全基因组DNA序列。同时以重组质粒为模板进行敏感性和保真性测定,其敏感性为102个初始模板,核苷酸的人为突变率为1.6bp/kb。结论此方法可用于大规模HBV全基因组扩增和序列分析,为HBV的基础和临床研究提供了一种新方法。

• 单位
  中山大学附属第三医院; 中心实验室