摘要
目的 探讨大黄酚对肝癌HCCLM3细胞增殖与转移的抑制作用及其作用机制.方法 采用克隆形成抑制实验和CCK-8实验检测大黄酚对HCCLM3细胞增殖的影响;通过Hoechst染色与Annexin V-FITC/PI检测大黄酚对HCCLM3细胞凋亡的影响;采用JC-1、TMRM染色检测大黄酚对HCCLM3细胞线粒体膜电位的影响;通过划痕实验与Transwell实验分析大黄酚对HCCLM3细胞转移的作用,采用Western blotting检测大黄酚对HCCLM3细胞凋亡相关蛋白PARP、cleaved caspase-3、BAX、Bcl-2及转移相关蛋白N-cadherin、MMP9、MMP2等的影响;采用DHR活性氧检测试剂盒检测大黄酚对HCCLM3细胞活性氧(ROS)产生的影响.结果 大黄酚可有效抑制HCCLM3细胞增殖(P<0.05),并具有剂量效应关系;JC-1与TMRM染色结果显示:大黄酚能明显降低HCCLM3细胞线粒体膜电位(P<0.05);划痕实验与Transwell实验结果显示:大黄酚能显著抑制HCCLM3细胞转移(P<0.05);ROS实验发现:大黄酚能显著增加细胞活性氧水平(P<0.05),从而杀伤肿瘤细胞;Westen blotting结果显示:大黄酚可促进PARP、cleaved caspase-3、BAX表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl-2及转移相关蛋白N-cadherin、MMP9、MMP2表达.结论 大黄酚能有效抑制人肝癌细胞增殖和转移,通过线粒体途径导致HCCLM3细胞凋亡.
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