基于时间分辨方法的LicT蛋白荧光动力学特性

作者：常孟方; 李磊; 曹潇丹; 贾梦辉; 周加胜; 陈缙泉; 徐建华

来源：Acta Physico - Chimica Sinica, 2017, 33(05): 1065-1070.

• 时间相关单光子计数
• 色氨酸
• 衰减相关光谱
• 时间分辨发射光谱
• 各向异性

使用时间分辨荧光方法,结合紫外吸收光谱和稳态荧光光谱技术,测量了LicT蛋白中色氨酸残基的荧光动力学特性,进而对LicT蛋白质激活前后的局部微环境和结构变化进行了研究。LicT蛋白质的激活态使得有关糖类利用的基因转录过程继续进行,促进机体新陈代谢。通过色氨酸残基的荧光发射和寿命的差异判断出激活型蛋白AC 141和野生型蛋白Q 22不同的结构性质和微环境差异。在此基础上,通过衰减相关光谱(DAS)和时间分辨发射光谱(TRES)阐释了两种蛋白色氨酸残基和溶剂的相互作用,说明了激活型AC 141的比野生型Q 22的结构更加紧密。此外,TRES还说明了蛋白中的色氨酸残基存在连续光谱弛豫过程。各向异性结果则对残基和整个蛋白的构象运动进行了阐述,说明了色氨酸残基在蛋白质体系内有独立的局部运动,且在激活型蛋白中该运动更加强烈。

• 单位
  中国科学院上海光学精密机械研究所; 华东师范大学; 精密光谱科学与技术国家重点实验室