陈山红心杉SCoT反应体系建立及引物筛选

作者:娄永峰; 宋晓琛; 冷春晖; 陈兴彬; 朱新传; 肖复明
来源:南方林业科学, 2021, 49(04): 1-4+32.
DOI:10.16259/j.cnki.36-1342/s.2021.04.001

摘要

研究采用正交设计及单因素相结合的方法建立优化陈山红心杉SCoT-PCR反应体系,并在此基础上进行引物筛选。结果表明:SCoT-PCR反应的最优体系(20.0μL)为:模板DNA 2.5μL(50.0 ng),2×Hieff PCR Master Mix9.0μL,引物3.0μL(即浓度1.5μmol·L-1);并在此基础上从36条SCoT引物中筛选出14条扩增条带丰富明亮且多态性较强的引物。这为今后利用SCoT分子标记研究陈山红心杉遗传多样性、种质资源鉴定等提供基础。

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