H3N8亚型马流感病毒HA基因重组腺病毒的构建及其生物学特性的研究

作者：刘春国; 刘明; 刘飞; 王伟; 刘大飞; 刘彦云; 吕让; 相文华

来源：中国兽医科学, 2014, 44(04): 362-366.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2014.04.005

• 马流感病毒
• H3N8亚型
• HA基因
• 重组腺病毒
• 生物学特性

为了构建表达H3N8亚型马流感病毒HA蛋白的重组腺病毒,把A/Equine/Xinjiang/3/2007(H3N8)的HA基因克隆到腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,将重组穿梭质粒pShuttle-XJ3HA电转化至BJ5183感受态细胞中,与人5型腺病毒骨架质粒同源重组,获得了重组腺病毒质粒pAd-XJ3HA。该质粒线性化后转染AD293细胞,包装重组腺病毒rAd-XJ3HA。通过PCR、间接免疫荧光试验(IFA)和Western-blot鉴定,证明HA基因已整合到腺病毒载体基因组中,并能够有效表达。该重组腺病毒在AD293细胞上连续传15代后仍表现出良好的遗传稳定性。马流感病毒HA基因重组腺病毒的成功构建为我国马流感重组病毒活载体疫苗的研究提供了技术储备。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院上海兽医研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所