CLCrV介导的VIGE体系承载力的研究

作者：赵燚; 雷建峰; 刘敏; 胡子曜; 代培红; 刘超; 李月; 刘晓东^*

来源：生物技术通报, 2022, 38(11): 210-219.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2022-0173

• 棉花叶皱缩病毒
• VIGE
• 棉花
• GhBsr-k1

探索CLCrV介导的VIGE体系的承载力。通过CLCrV介导的sgRNA投送系统将基因编辑载体注射过表达Cas9的棉花，提取棉花基因组DNA，利用PCR/RE的方法筛选有效的sgRNA。然后利用同样的方法来检测CLCrV介导的VIGE体系的承载力。基于棉花GhBsr-k1基因成功构建了6个基因编辑载体，其中2个基因编辑载体实现了对棉花GhBsr-k1基因的靶向编辑；将完整的基因编辑载体元件构建到CLCrV病毒载体上并没有检测到棉花细胞中发生基因编辑。针对棉花GhBsr-k1基因，筛选到两个有效的sgRNA。但承载整个CRISPR/Cas9系统的CLCrV载体难以在棉花叶片中实现有效的基因编辑。

• 单位
  新疆农业大学; 生命科学学院