肝癌细胞乙酰胆碱酯酶表达水平与丙型肝炎病毒感染之间的相互影响

作者：罗正汉; 刘燕; 刘阳; 唐海琳; 徐铮昊; 戚中田; 赵平^*

来源：第二军医大学学报, 2018, 39(12): 1302-1308.

DOI：10.16781/j.0258-879x.2018.12.1302

• 丙型肝炎病毒
• 黄病毒感染
• 乙酰胆碱酯酶
• 胆碱酯酶抑制剂
• AchE活性

目的探讨丙型肝炎病毒(HCV)感染对乙酰胆碱酯酶(AchE)表达水平的影响以及细胞内AchE活性的变化对HCV感染的影响。方法以细胞培养来源的HCV(HCVcc)感染人肝癌细胞系Huh7细胞,用蛋白质印迹法以及实时荧光定量PCR(qPCR)进一步验证HCV感染对AchE表达水平的影响,AchE活性检测试剂盒检测细胞内AchE活性的变化。以AchE抑制剂多奈哌齐和伊托必利处理Huh7细胞,同时用HCVcc感染,通过蛋白质印迹法以及免疫荧光法检测Huh7细胞的HCV感染情况。用针对AchE基因的小干扰RNA(siRNA)转染Huh7细胞,随后用HCVcc感染Huh7细胞,通过蛋白质印迹法和免疫荧光法检测AchE的表达以及HCV感染情况。结果 HCVcc感染Huh7细胞60 h后,AchE蛋白表达水平升高,同时酶活性也增强(P均<0.01)。AchE抑制剂呈浓度依赖性抑制HCV对Huh7细胞的感染(P<0.01)。用siRNA敲低AchE的表达后,HCV对Huh7细胞的感染降低(P<0.01)。结论 HCV感染Huh7细胞能上调AchE的表达并增强AchE活性,AchE表达增加和活性增强都能促进HCV的感染,表明AchE在HCV感染Huh7细胞的过程中起着正反馈增强感染的作用。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学