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摘要
由于黄芪的轮作周期缩短、连作面积连续增加，导致黄芪根腐病的发病率大大增加。目前，黄芪根腐病成为限制黄芪产量的主要因素之一，严重制约着黄芪产业的持续发展。虽然多种镰刀菌在整个种植季均可侵染黄芪，但尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）是造成黄芪根部腐烂最主要的病原菌之一。镰刀菌在不同的培养基上形态不同，由多种镰刀菌引起的黄芪根腐症状通常很难根据其形态学的特征加以区分，需要通过一些基因测序手段。翻译延伸因子（TEF-1alpha）已被广泛应用于研究镰刀菌属的种内和种间变异和系统发育。因此，可以针对TEF-1alpha区域为靶点设计LAMP引物。为了给尖孢镰刀菌的野外和现场快速检测提供新思路，为黄芪根腐病病害的田间快速诊断提供一个简便快速的新技术，研究针对尖孢镰刀菌翻译延伸因子（TEF-1alpha）序列设计引物，优化环介导等温扩增（LAMP）反应时间和温度，测试LAMP反应的灵敏性和特异性，构建黄芪根腐病尖孢镰刀菌的LAMP快速检测方法。结果表明，反应最适温度为62℃，最适时间为30 min；在最佳反应条件下，黄芪根腐病尖孢镰刀菌的LAMP快速检测方法对尖孢镰刀菌具有良好的特异性，灵敏度可达到10 pg/μL；在反应开始前加入SYBR Green I显色剂，可在反应结束后观察检测结果。
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