重组仿刺参超氧化物歧化酶在大肠杆菌中表达条件的优化及分离纯化

作者：黄君; 张晓天; 李月; 穆贤; 丛丽娜; 李成^*

来源：大连工业大学学报, 2019, 38(02): 92-96.

DOI：10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2019.0204

• 仿刺参
• 超氧化物歧化酶
• 抗氧化活性

利用基因工程菌BL21(DE3)/pET30a(+)-SOD1,优化表达重组仿刺参超氧化物歧化酶蛋白(rAj-SOD1)。采用摇瓶发酵优化rAj-SOD1可溶性表达的条件,提高蛋白的表达产量。结果表明,在温度30℃、转速200 r/min、0.1 mmol/L IPTG诱导8 h条件下,菌体中rAj-SOD1蛋白表达量最大,达到315.59 mg/L。电泳检测结果表明,rAj-SOD1的纯度为96.7%,符合后续酶活要求。纯化后rAj-SOD1质量浓度为98.73 mg/L,收率为31.28%。邻苯三酚法对rAj-SOD1蛋白进行活性分析,结果表明,纯化的rAj-SOD1蛋白具有明显的抗氧化活性。

• 单位
  大连工业大学; 生物工程学院