Clusterin抗原的表达、抗体制备及其初步鉴定

作者：张迎春; 刘莹; 杨金菊; 柳晓兰; 迟俊; 高建恩; 唐晓波; 朱大岭; 孙启鸿

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2008, (01): 45-48.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.004499

• Clusterin
• 原核表达
• 多克隆抗体
• 单克隆抗体 clusterin
• prokaryotic expression
• polyclonal antibody
• monoclonal antibody

目的:制备Clusterin(CLU)多克隆和单克隆抗体(mAb),并进行特性鉴定。方法:以成人肝cDNA表达文库为模板,构建重组表达质粒pGEX-4T-1-CLU和PET-32a-CLU。GST-CLU融合蛋白在大肠杆菌中表达,被作为免疫原制备兔多抗和鼠mAb。采用ELISA法和Western blot鉴定抗CLU抗血清在重组蛋白和天然蛋白中的特异性。采用West-ern blot,间接免疫荧光,免疫组化鉴定mAb的特异性。结果:GST-CLU融合蛋白在相对分子质量(Mr)约54 000处呈现明显表达条带。Western blot鉴定表明,制备的抗CLU兔多克隆抗体可特异地识别成人肝总蛋白中...

• 单位
  军事医学科学院放射与辐射医学研究所; 蛋白质组学国家重点实验室; 北京蛋白质组研究中心