胰岛素样生长因子2基因干扰对人膀胱癌细胞HTB-95637细胞周期和增殖的影响

作者：钱苏波; 陈牧; 沈海波; 齐隽

来源：中国临床药理学与治疗学, 2014, 19(11): 1233-1237.

• 膀胱癌
• 胰岛素样生长因子2
• 小干扰RNA
• 细胞增殖
• 细胞周期

目的:探讨胰岛素样生长因子2(insulinlike growth factor 2,IGF2)基因干扰对人膀胱癌细胞株HTB-95637细胞周期和增殖的影响。方法:以人膀胱癌细胞株HTB-95637为研究对象,针对其IGF2基因序列设计小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA),筛选出能高效沉默目标基因的片段序列后,重组其短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)腺病毒表达载体,转染人膀胱癌细胞株HTB-95637,筛选出能稳定表达干扰质粒的细胞克隆。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫印迹法(Western blot)分别检测转染后IGF2的mRNA和蛋白表达水平,用四甲基偶氮唑蓝法(MTT法)检测细胞增殖能力,用PI单染流式细胞术分析细胞周期的改变。结果:RT-PCR和Western blot结果显示,shRNA对IGF2在基因和蛋白表达水平均有显著的下调作用。稳定转染IGF2-shRNA的人膀胱癌细胞株HTB-95637的生长速度明显减缓,处于细胞周期S期的细胞比例由42.0%±3.8%上升至70.2%±5.2%,而处于G2/M期的细胞比例由9.7%±2.4%下降为1.5%±1.6%。结论:靶向IGF2基因的shRNA可抑制膀胱癌细胞株HTB-95637细胞IGF2基因的表达,调控HTB-95637的细胞周期,抑制HTB-95637的细胞增殖,具有潜在的开发应用前景。

• 单位
  上海交通大学; 上海交通大学医学院附属新华医院