CD34+CD38-KG1a白血病干细胞对同种异体自然杀伤细胞的抵抗作用及其机制

作者：王国征; 吴远彬; 郭坤元; 代喜平^*

来源：新乡医学院学报, 2019, 36(09): 828-832.

DOI：10.7683/xxyxyxb.2019.09.006

• CD34+CD38-KG1a细胞
• 自然杀伤细胞
• 细胞毒实验
• NKG2D配体

目的探讨CD34+CD38-KG1a白血病干细胞抵抗同种异体自然杀伤(NK)细胞杀伤作用的机制。方法采用免疫磁珠法(MACS)分选CD34+CD38-KG1a细胞和4例健康个体外周血中NK细胞,并采用流式细胞术检测纯度;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测NK细胞在不同效靶比(5∶1,10∶1,20∶1)下对K562和CD34+CD38-KG1a细胞的杀伤作用;聚合酶链式反应-序列特异性引物法分析NK细胞KIR和CD34+CD38-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因分型;流式细胞术检测K562和CD34+CD38-KG1a细胞表面主要组织相容性复合体(MHC)-I类链相关分子A/B、人巨细胞病毒UL16结合蛋白(ULBP) 1～3和人类白细胞抗原(HLA)-Ⅰ类分子的表达。结果分选的CD34+CD38--KG1a细胞和NK细胞纯度分别为(94. 25±2. 16)%、(91. 70±2. 05)%。NK细胞在各效靶比下对CD34+CD38-KG1a细胞的杀伤率均低于K562细胞(P <0. 05)。4例健康个体NK细胞KIR基因型为KIR2DL1、KIR2DL3、KIR3DL1和KIR3DL2,CD34+CD38-KG1a细胞HLA-Ⅰ基因型为A30、30,B51、78,Cw4、16。K562细胞高表达NKG2D配体,CD34+CD38-KG1a细胞几乎不表达NKG2D配体,CD34+CD38-KG1a细胞中NKG2D配体表达率显著低于K562细胞(P <0. 05); K562细胞中几乎不表达HLA-Ⅰ,CD34+CD38-KG1a细胞高表达HLA-Ⅰ,CD34+CD38-KG1a细胞中HLA-Ⅰ的表达率显著高于K562细胞(P <0. 05)。结论 CD34+CD38-KG1a细胞明显抵抗同种异体NK细胞的杀伤作用,其机制可能与高表达HLA-Ⅰ分子和低表达NK2D配体有关。

• 单位
  广州中医药大学第二附属医院; 广东省中医院