嵌合有HCV多中和抗原表位的乙肝S抗原病毒样颗粒的制备与鉴定

作者：王晓岩; 张海; 雷迎峰; 林芳; 崔颖; 李斌; 舒放; 张惠中; 韦三华

来源：现代免疫学, 2017, 37(02): 107-110.

• 丙型肝炎病毒
• 中和表位
• 病毒样颗粒
• 制备

制备嵌合HCV多中和表位及HCV包膜蛋白E2的HBV S抗原病毒样颗粒(virus-like particle,VLP),并进行鉴定、纯化和浓缩。HEK293T细胞用DMEM培养至90%密度时,将构建的重组真核表达载体pCI-MEpS、pCI-E2S用脂质体法转染HEK293T细胞,48h后在培养上清中得到自我装配的嵌合HCV多中和表位及包膜蛋白E2的HBV病毒样颗粒(VLP-MEpS,VLP-M2S)。蔗糖密度梯度离心,透析浓缩后,电化学发光法进行HBsAg定量测定、电镜分析和Western blotting鉴定。制备出的嵌合病毒样颗粒VLP-MEpS和VLP-E2S经浓缩后其HBsAg定量最高达到3×104 ng/mL。实验表明我们成功制备出嵌合有HCV多中和抗原表位的HBV VLP,为进一步分析诱导的中和抗体研究奠定基础。

• 单位
  第四军医大学; 唐都医院