绵羊lncRNA-MRLN基因的克隆和蛋白编码能力分析

作者：刘芝瑾; 曹洋; 吾热力哈孜·哈孜汗; 倪伟; 王大伟; 胡圣伟^*

来源：动物医学进展, 2018, 39(12): 37-42.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2018.12.008

• 长链非编码RNA
• MRLN
• 克隆
• 转染
• 真核表达

为了验证长链非编码MRLN基因具有蛋白编码能力,通过提取哈萨克羊胚胎期比目鱼肌总RNA,用RT-PCR获得lncRNA-MRLN基因;用EGFP自身发光及不影响目的蛋白特性的特点,构建了pcD-MRLN-EGFP融合表达载体,且转染293T细胞对lncRNA-MRLN是否具有蛋白编码能力进行分析。结果表明,重组质粒经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切成1 059bp和5 428bp片段,真核表达载体pcDNA 3.1(+)中插入MRLN和EGFP基因,经测序编码框正确;转染293T细胞后,在荧光显微镜下可以观察到绿色荧光,且通过RT-PCR在RNA水平上可检测到lncRNA-MRLN的表达,说明lncRNA可以编码蛋白。

• 单位
  生命科学学院; 动物科技学院; 石河子大学