摘要
目的探讨微小RNA(miRNA,miR)-145及蛋白激酶Bγ(Akt3)甲状腺癌组织中的表达,以及miR-145靶向Akt3调节甲状腺癌细胞增殖和侵袭的机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)法检测手术切除的49例新鲜甲状腺癌组织及癌旁组织miR-145和Akt3的表达,分析Akt3与miR-145表达之间的关系。以甲状腺癌细胞株(TPC-1)作为研究对象,采用噻唑蓝(MTT)和Transwell侵袭实验检测miR-145对甲状腺癌细胞生长、侵袭转移能力的影响,Akt3表达水平采用Western blot进行。结果反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测结果显示,甲状腺癌组织和癌旁组织中miR-145相对表达量分别为1.65±0.33和3. 13±0.53,Akt3相对表达量分别为2. 96±0. 85和0. 83±0. 32,两者差异有统计学意义(P=0. 000);TPC-1细胞和原发性甲状腺滤泡细胞miR-145相对表达量分别为1. 91±0. 57和3. 47±0. 59, Akt3相对表达量分别为3. 62±1. 04和0. 76±0. 32,两者差异有统计学意义(P=0. 000)。转染抗miR-145的TPC-1细胞吸光度(A)570增加最为迅速,转染miR-145类似物的TPC-1细胞A570上升最慢(P=0.000)。与未转染TPC-1细胞和仅采用脂质体2000转染的TPC-1细胞比较,抗miR-145转染细胞侵袭细胞数显著增加(P=0. 000),而miR-145类似物转染的TPC-1细胞侵袭数量显著降低(P=0. 000)。miR-145类似物转染与未转染的TPC-1细胞磷酸化Akt(p-Akt)和Akt-3蛋白表达水平明显低于抗miR-145转染TPC-1细胞。结论 miR-145能够靶向下调Akt3表达水平抑制甲状腺癌细胞的增殖和侵袭。
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