抗HIV-1 gp120单克隆抗体的制备及鉴定

作者：张永臣; 文剑; 张亮; 赵磊

来源：中国生化药物杂志, 2010, (01): 26-28+31.

• HIV-1gp120抗原
• 原核表达
• 单克隆抗体
• 杂交瘤细胞 HIV-1 gp120 antigen
• prokaryotic expression
• monoclonal antibody
• hybridoma cell

目的制备抗HIV-1 gp120单克隆抗体,鉴定其特性,为进一步研制HIV治疗性抗体提供贮备。方法将HIV-1 gp120基因片段连接到经酶切的原核表达载体PEGX-4T-2中,利用大肠杆菌XL1-blue表达GST-HIV蛋白。表达的蛋白纯化后免疫BALB/c小鼠,取免疫小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,间接ELISA筛选阳性克隆。重组免疫印迹分析(RIBA)和Western blot检测抗体特异性。结果构建的重组质粒的外源基因片段经测序与预期HIV-1 gp120抗原基因片段大小一致。纯化蛋白SDS-PAGE可见1条相对分子质量(Mr)32 000的表达蛋白条带。获得6株稳定分泌单克隆...

• 单位
  东南大学