硫酸软骨素酶ABC联合BMSCs修复大鼠脊髓损伤的实验研究

作者：张纯; 贺西京; 李浩鹏

来源：中国修复重建外科杂志, 2013, 27(05): 541-546.

• BMSCs
• 硫酸软骨素酶ABC
• 脊髓损伤
• 细胞治疗
• 大鼠

目的探讨硫酸软骨素酶ABC(chondroitinase ABC,ChABC)联合BMSCs对大鼠脊髓损伤的修复作用。方法取新生SD大鼠股骨、胫骨骨髓分离培养原代BMSCs。取成年雄性SD大鼠24只,体重200～230 g,制备脊髓挤压伤模型后,随机分为脊髓损伤对照组(A组)、BMSCs移植组(B组)、ChABC注射组(C组)和ChABC联合BMSCs移植组(D组),每组6只。伤后7、14 d采用BBB评分法评价大鼠后肢运动功能;伤后14 d取材行HE染色计算损伤区面积;采用免疫荧光染色法观察胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)/硫酸软骨素蛋白多糖(chondroitin sulfate proteoglycan,CSPG)和GFAP/生长相关蛋白43(growth associated protein 43,GAP43)双标表达情况。结果伤后7 d各组大鼠均恢复了后肢3个关节的运动,各组BBB评分比较差异无统计学意义(P>0.05);伤后14 d A、B、C组大鼠后肢3个关节无负重拖动,D组大鼠足底位于负重位或偶尔足背负重步行,D组BBB评分高于其余3组(P<0.05)。伤后14 d HE染色示,各组损伤区形成空洞,空腔内及其周边存在大量巨噬细胞,空洞周围被瘢痕组织包裹;D组损伤区面积显著小于其余3组(P<0.05)。伤后14 d,GFAP/CSPG双重免疫染色示D组星形胶质细胞瘢痕损伤区明显减少,未见空洞形成;相对于A组的荧光强度值结果显示,C、D组显著低于B组(P<0.05)。GFAP/GAP43双重免疫染色示D组GAP43免疫组织化学染色阳性纤维穿过损伤区;相对于A组的荧光强度值结果显示,D组显著高于B、C组(P<0.05)。结论采用ChABC早期抑制星形胶质细胞分泌CSPG,并联合BMSCs移植可促进神经纤维再生,对大鼠脊髓损伤有一定修复作用。

• 单位
  西安交通大学医学院第二附属医院