人表皮生长因子基因转染原代角质形成细胞

作者：周建大; 王少华; 罗成群; 谢慧清; 刘进言; 胡媛; 谭建湘; 李文波; 陈勇

来源：激光生物学报, 2009, (02): 184-188.

• 皮肤
• 表皮生长因子
• 基因
• 角质形成细胞
• 质粒 skin
• epidermal growth factor(EGF)
• gene
• keratinocyte
• plasmid

目的:将带信号肽的人表皮生长因子基因转染原代成人角质形成细胞,证实细胞活性及hEGF的有效表达,为后期的皮肤修复研究打下基础。方法:先酶切验证pcDNA3.1-hEGF,后消化成人皮肤组织,以DefinedKeratinocyte-SFM(DKSFM)传代培养角质形成细胞并鉴定,脂质体转染质粒pcDNA3.1-hEGF入细胞,转基因细胞培养48h后作RT-PCR和Western-blot分析,上清分别进行放射免疫测定和MTT测定。结果:质粒pcDNA3.1-hEGF上的hEGF序列经测序证实,双酶切后获得约230bp和5.4kb条带;成人角质形成细胞体外培养可快速稳定增殖,转hEGF基因细胞经...

• 单位
  湖南省计划生育研究所; 中南大学湘雅三医院