摘要

以合子胚作为保存材料,进一步分析超低温保存处理前后的水曲柳合子胚细胞各生理生化指标的变化情况,明确冷冻方式和脱水时间对生理生化指标的影响,为建立水曲柳优良遗传材料长期保存方法提供生理数据支撑。在脱水120 min条件下,合子胚经快冻法保存后,细胞内脱氢酶活性最高,同时过氧化氢酶活性、过氧化物酶活性、脯氨酸质量分数均达到最大值,分别为1 168.85 U·g-1·min-1、338.33 U·g-1·min-1、394.99μg·g-1;经玻璃化法保存后,合子胚细胞内脱氢酶活性、脯氨酸含量、过氧化物酶活性、过氧化氢酶活性均为最小值;经慢冻法保存后,合子胚细胞内可溶性蛋白质量分数和超氧化物歧化酶活性均达到最大值,分别为18.82 mg·g-1和361.97 U·g-1,显著高于其他冷冻方法。干燥脱水120 min结合快冻法处理条件下,合子胚的活力达到最高值。研究结果表明,不同冷冻方式、不同脱水时间及二者的交互作用均会影响水曲柳合子胚的存活率和各项生理指标。除丙二醛质量分数降低外,水曲柳合子胚细胞内脱氢酶活性、抗氧化酶活性、脯氨酸质量分数、可溶性蛋白质量分数在经不同冷冻方式保存后,均随脱水时间增加而增加。超低温保存处理后的合子胚及体胚的存活率可达62.26%和51.68%。因此认为,干燥脱水120 min结合快冻法适合水曲柳胚胎的超低温保存。