3种常见金银花致病菌多重实时荧光定量PCR检测方法研究

作者：朱桐杉; 刘艳艳; 谭晴晴; 刘国霞; 陈雪燕; 步迅; 王文博; 于子涵; 张全芳^*; 张永清^*

来源：山东农业科学, 2023, 55(07): 145-151.

DOI：10.14083/j.issn.1001-4942.2023.07.020

• 金银花
• 炭疽病
• 白粉病
• 褐斑病
• 多重实时荧光定量PCR

为了建立可同时检测炭疽病病原菌(Colletotrichum gloeosporioides)、白粉病病原菌(Erysiphe lonicera)和褐斑病病原菌(Cercospora rhamni)3种金银花重要叶部病原菌的多重实时荧光定量PCR快速检测方法，本试验基于3种病原菌ITS片段序列分别设计特异引物和TaqMan荧光探针，并制备重组质粒建立标准曲线；对建立的多重实时荧光定量PCR检测方法进行特异性、灵敏度、准确性验证。结果表明，本研究建立的多重实时荧光定量PCR快速检测方法仅针对金银花炭疽病、白粉病和褐斑病病原菌有特异性扩增；最低检测限为2.94×102 copies/μL,比普通PCR法高100倍；利用本方法检测15份有叶部病害症状的金银花病叶，与DNA测序结果完全一致。综之，本研究建立的多重实时荧光PCR检测方法特异性强、灵敏度高，为金银花炭疽病、白粉病和褐斑病的早期诊断提供了技术支持。

• 单位
  山东中医药大学; 山东中医药大学附属医院; 山东省农业科学院