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摘要
目的 筛选乳腺癌差异表达的miRNAs-mRNA,探讨差异miRNAs的表达及与靶基因的关系。方法 利用肿瘤基因组图谱(TCGA)筛选乳腺癌中差异表达的4种miRNAs;利用qRT-PCR验证4种miRNAs在多种细胞株中的表达；结合GO和KEGG确定4种miRNAs的靶基因。利用CCK-8法检测各组细胞的活力；利用双荧光素酶报告基因验证miRNAs与对应靶基因的作用关系。结果 通过TCGA结合文献筛选差异的miRNAs分别为hsa-miR-122、hsa-miR-133b、hsa-miR-449a和hsa-miR-767。根据GO和KEGG分析hsa-miR-122-5p、hsa-miR-133b-5p、hsa-miR-449a-5p和hsa-miR-767-5p的靶基因分别为ESR1、EGFR、HMGB1和IGF-1。与mimics-NC组(1.52±0.01)比较，mimics hsa-miR-122组(1.75±0.01)、mimics hsa-miR-767组(1.87±0)和mimics hsa-miR-449a组(1.71±0.01)的细胞活力显著升高(P<0.01)。转染miR-122-5p(0.80±0.03)可降低ESR1 3′-UTR野生型MCF-7细胞的相对荧光活性比值(P<0.000 1),转染miR-133b-5p(0.96±0.03)可降低EGFR 3′-UTR野生型MCF-7细胞的相对荧光活性比值(P<0.000 1),转染miR-499a-5p(0.77±0.03)可降低HMGB1 3′-UTR野生型MCF-7细胞的相对荧光活性比值(P<0.000 1),转染miR-767-5p(0.62±0.03)可显著降低IGF-1 3′-UTR野生型MCF-7细胞的相对荧光活性比值(P<0.000 1);IGF-1表达与患者年龄、原发肿瘤分期有相关性(P<0.05)。结论 乳腺癌细胞株中4种差异表达的miRNAs分别与ESR1、EGFR、HMGB1和IGF-1靶向结合，IGF-1表达与患者年龄、原发肿瘤分期有相关性。
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