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摘要
探究菌龄、稳渗剂种类、溶壁酶质量浓度、酶解温度、酶解时间和再生培养基对齿毛菌原生质体制备及再生的影响,并利用PEG介导原生质体转化.结果表明:以0.6 mol·L-1甘露醇为稳渗剂,20 mg·m L-1溶壁酶于30℃酶解48 h菌龄的菌丝3 h,所得原生质体形成数最多,为1×108个·m L-1;所得原生质体在0.8 mol·L-1蔗糖为稳渗剂的2号培养基中再生率最高,为0.1%; PEG介导原生质体转化,经潮霉素B抗性平板筛选获得2个转化子.实验建立的齿毛菌原生质体制备及转化体系,为其遗传操作及分子生物学研究奠定基础.
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