敲低EphB1基因对过氧化氢诱导的大鼠心肌细胞氧化损伤的影响

作者：张杰^*; 周辉; 刘亮; 郭桂喜; 于强; 银鹏飞; 陈文强; 苏兴

来源：吉林大学学报(医学版), 2019, 45(04): 819-824.

DOI：10.13481/j.1671-587x.20190413

• 促红细胞生成素产生肝细胞受体基因
• 心肌细胞
• 氧化损伤
• 细胞增殖
• 细胞凋亡

目的:探讨敲低EphB1基因对过氧化氢(H2O2)诱导的大鼠心肌H9c2细胞氧化损伤的影响,为EphB1基因治疗心血管疾病提供依据。方法:体外培养大鼠心肌H9c2细胞,分为空白组(不做任何处理)、H2O2组(H2O2细胞损伤)、阴性对照组(转染siRNA control)和转染si-EphB1组(转染si-EphB1后H2O2细胞损伤)。实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测各组H9c2细胞中EphB1基因表达水平,噻唑蓝(MTT)法检测各组H9c2细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,DCFH-DA探针法检测各组细胞内活性氧(ROS)水平,分光光度计法检测各组细胞中丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平。结果:与空白组比较,H2O2组H9c2细胞中EphB1mRNA表达水平明显升高(P<0.05),阴性对照组H9c2细胞中EphB1mRNA表达水平无明显变化(P>0.05);与H2O2组比较,转染si-EphB1组H9c2细胞中EphB1mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。与空白组比较,H2O2组细胞存活率降低(P<0.05),细胞凋亡率升高(P<0.05),ROS和MDA水平升高(P<0.05),SOD水平降低(P<0.05),而阴性对照组细胞存活率、凋亡率、ROS、MDA和SOD水平差异无统计学意义(P>0.05);与H2O2组比较,转染si-EphB1组细胞存活率升高(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),ROS和MDA水平降低(P<0.05),SOD水平升高(P<0.05)。结论:敲低EphB1基因能够抑制H2O2诱导的大鼠心肌细胞氧化损伤,起到心肌保护作用,其机制与提高心肌细胞存活率、抑制细胞凋亡、改善抗氧化酶活性和提高细胞内氧化应激产物清除能力有关。

• 单位
  山东大学齐鲁医院; 北京大学