妊娠期糖尿病大鼠的胎鼠肺结构和肺表面活性蛋白B、C及其调控因子表达

作者：邓飞涛; 张莉; 葛凉芳; 张青苗; 邹丽^*

来源：中华围产医学杂志, 2015, 18(08): 625-631.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1007-9408.2015.08.017

• 糖尿病, 妊娠
• 肺
• 肺表面活性物质相关蛋白质B
• 肺表面活性物质相关蛋白质C
• 核蛋白质类
• 转录因子
• DNA结合蛋白质类
• RNA结合蛋白质类
• 大鼠

目的通过对GDM大鼠胎鼠的肺组织结构及肺表面活性蛋白(surfactant proteins, SP)-B、SP-C、甲状腺转录因子(thyroid transcription factor, TTF)-1、多形性腺瘤样因子(pleiomorphic adenoma gene like, PLAGL)-2蛋白表达水平进行研究, 探讨GDM大鼠胎鼠肺发育障碍的机制。方法清洁级健康成年Sprague-Dawley大鼠构建孕鼠GDM模型, 共20只造模成功, 对照组为20只正常孕鼠。于妊娠第21天检测孕鼠随机血糖, 并行剖宫取胎术, 胎鼠计数并称重。透射电子显微镜下观察肺泡Ⅱ型上皮细胞的超微结构。每组随机取60只胎鼠, 取肺组织制作360张石蜡切片, 随机取100张不连续切片, 光镜下观察肺组织形态结构;随机取另外100张不连续切片, 免疫组织化学法检测SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2的蛋白定位及表达。每组取9只胎鼠, 蛋白质印迹技术检测胎鼠肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2蛋白水平。每组取27只胎鼠, 荧光实时定量聚合酶链反应检测胎鼠肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2的mRNA水平。采用独立样本t检验进行统计学分析。结果 GDM组孕鼠平均随机血糖值高于对照组[(26.8±2.8)与(4.9±0.5)mmol/L, t=-34.05, P=0.00]。GDM组胎鼠平均体重高于对照组[(5.6±0.6)与(5.2±0.5)g, t=-1.97, P=0.03]。GDM组与对照组肺泡个数分别为(10.1±1.6)与(12.1±1.3)个, 肺泡面积分别为(986.9±5.5)与(1 257.3±5.0)μm2, GDM组均低于对照组(t值分别为9.84和27.53);肺泡间隔分别为(11.5±6.2)与(9.9±4.3)μm, GDM组高于对照组(t=-2.17), 差异均有统计学意义(P值均<0.05)。透射电镜下, 可见GDM组肺泡Ⅱ型上皮细胞表面微绒毛粗短、减少, 板层小体数量减少。胎肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2蛋白均沿胞浆呈颗粒状分布, GDM组4种蛋白表达的平均吸光度分别为1.15±0.12、1.23±0.06、0.87±0.21与1.21±0.18, 对照组分别为1.22±0.05、1.31±0.14、1.12±0.09与1.33±0.07, GDM组均低于对照组, 差异有统计学意义(t值分别为2.40、2.35、4.89和2.77, P值均<0.01)。GDM组胎肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2的蛋白水平分别为0.57±0.09、0.45±0.03、1.50±0.04和1.11±0.04, 对照组分别为0.81±0.03、0.66±0.04、1.69±0.05和1.46±0.07, GDM组均低于对照组, 差异有统计学意义(t值分别为11.77、11.09、8.80和13.37, P值均<0.01)。GDM组胎肺组织中SP-B、SP-C、TTF-1和PLAGL-2mRNA水平分别为0.60±0.04、0.79±0.04、0.81±0.03和0.79±0.05, 对照组分别为1.06±0.19、1.03±0.24、1.03±0.18和1.02±0.19, GDM组均低于对照组, 差异有统计学意义(t值分别为6.80、2.98、3.54和3.54, P值均<0.01)。结论 GDM大鼠的胎鼠肺组织中SP-B和SP-C蛋白水平均明显下降, 可能由于TTF-1和/或PLAGL-2基因表达下调所致;SP-B和SP-C蛋白减少与胎肺结构的病理变化有密切关联。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院