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摘要
为了研制一种能够对产肠毒素大肠杆菌菌毛和毒素两大靶点有效抑制的特异性卵黄抗体产品,试验联合产肠毒素大肠杆菌K88、K99、987P、F18、F41菌毛和重组肠毒素STa-LTB-STb(SLS)制备多价抗原并免疫蛋鸡,通过水稀释-硫酸铵沉淀法结合超滤浓缩对卵黄抗体进行分离纯化,利用SDS-PAGE及ELISA测定其纯度及效价,胶体金标记法和碳氢吸附试验考察特异性卵黄抗体的吸附效果及其对菌体表面疏水性的影响,并初步探讨了特异性卵黄抗体的体外抑菌效果。结果表明:本试验所用工艺可将卵黄抗体的最终纯度提高至84.8%,多价卵黄抗体对各抗原成分效价峰值均高于或等于1∶8×103,最高可达1∶3.2×104,表明多价抗原具有良好的免疫原性,适于卵黄抗体的批量生产。透射电镜下观察到特异性卵黄抗体对菌体的结合吸附效果明显。LB液体培养基中,K88、K99、987P、F18和F41株ETEC的增殖均受到明显抑制。碳氢吸附试验显示,卵黄抗体的结合作用能够显著提高菌体表面的疏水性,使其倾向于从水相中脱离。说明菌毛-肠毒素多价特异性卵黄抗体能够通过与ETEC菌体高效特异性吸附结合达到显著的抑菌效果。
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