尼妥珠单抗对结直肠癌caco-2细胞株放射敏感性影响的研究

作者：方晶^*; 冯建国; 杨洋; 张娜; 刘鲁迎; 罗加林; 刘建江; 朱远

来源：中华肿瘤防治杂志, 2018, 25(S2): 1-2.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2018.s2.001

• 结直肠癌
• 尼妥珠单抗
• 放射增敏
• 周期阻滞
• 细胞凋亡
• DNA修复

目的探讨尼妥珠单抗(h-R3)对人结直肠细胞株caco-2的放射增敏作用及机制。方法 MTT检测不同浓度尼妥珠单抗对caco-2细胞株生长增殖的影响,选择IC20作为后续实验的浓度;通过克隆形成试验计算克隆形成率,拟合多靶单击存活曲线,并计算反映放射敏感性指标的细胞存活分数(SF2)、平均致死量(D0)、准阈剂量(Dq)和放射增敏比(SER)等;采用流式细胞仪检测细胞周期分布情况及凋亡率;Western-blot试验研究凋亡相关蛋白bcl-2、bax及DNA修复相关蛋白ATM、rad51、ku80、xrcc1、parp-1等表达的变化情况。结果尼妥珠单抗作用于caco-2的IC20为50ug/mL,并以此浓度作为后续试验的浓度;与单纯照射组相比,尼妥珠单抗联合照射组中caco-2细胞的克隆形成能力显著减弱,SF2、D0、Dq均明显下降,放射增敏比为1.118(P<0.01);细胞周期分析提示联合组中发生G2/M期阻滞的细胞比例明显增加(P<0.05),同时处于S期的细胞比例减少(P<0.05);尼妥珠单抗联合照射后凋亡率为(51.5±1.13)%,明显高于单药组的(25.04±2.17)%及单放组的(38.19±1.96)%(P<0.05);Western-blot结果显示h-R3可显著降低照射后caco-2细胞中DNA修复相关蛋白ATM、rad51、ku80、xrcc1、PARP-1及抗凋亡蛋白bcl-2等的表达,而凋亡蛋白bax表达则升高。结论尼妥珠单抗可显著增加结直肠癌caco-2的放射敏感性,其机制与h-R3诱导G2/M期阻滞,增加细胞凋亡及抑制DNA修复有关。

• 单位
  浙江省中医药大学; 浙江省肿瘤医院