F10蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备

作者：付欣; 邹东霆; 周问渠; 邢福祺; 李冰

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2007, (09): 856-858.

• F10基因
• 原核表达
• 抗体 F10 gene
• prokaryotic expression
• antibody

目的:表达F10蛋白,并制备兔抗F10多克隆抗体。方法:利用PCR方法扩增F10基因片段,经BamH I和EcoR I酶切后连接入pET-GST原核表达载体,构建的pET-GST/F10融合重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达蛋白,并以亲和层析的方法进行纯化。表达产物用SDS-PAGE电泳和Western blot进行分析鉴定。以纯化的F10蛋白免疫新西兰大白兔,制备兔抗F10的多克隆抗体,并以ELISA法检测抗体效价。结果:经酶切和核酸序列分析证实重组质粒包含有正确编码的F10读码框。SDS-PAGE电泳分析显示pET-GST/F10诱导后表达一相对分子质量(Mr)约为61 ...

• 单位
  南方医科大学; 广州医科大学; 南方医院