hLMO3基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位

作者：顾卉; 佟宇鑫; 刘彤; 李妍; 李丹妮; 袁正伟

来源：解剖科学进展, 2011, (04): 347-350.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2011.04.001

• hLMO3基因
• 质粒构建
• 基因表达与定位
• 人HEK293细胞 LIM domain only 3 gene
• plasmid construction
• gene expression and localization
• human HEK293 cells

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位。结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内。...

• 单位
  中国医科大学; 中国医科大学附属盛京医院