PHF5A通过NF-κB通路影响胃癌细胞MGC803的增殖和迁移

作者：曹一凡; 张如通; 苟雅雯; 陈乐乐; 陈思; 张开光^*

来源：安徽医科大学学报, 2020, 55(08): 1198-1203.

DOI：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2020.08.010

• 胃癌
• PHF5A
• NF-κB信号通路
• MGC803

目的观察PHD锌指结构域蛋白5A(PHF5A)基因在胃癌细胞和胃正常细胞中的表达情况,阐明敲低PHF5A基因可能通过影响NF-κB通路抑制胃癌细胞的增殖、克隆形成和迁移。方法使用Western blot和qPCR法检测PHF5A在胃正常上皮细胞GES-1和胃癌细胞系MGC803、MKN45、AGS中的表达情况。设置转染PLKO.1空载质粒的MGC803细胞为阴性对照,转染PLKO.1-ShPHF5A-Sh1和PLKO.1-ShPHF5A-Sh2质粒的作为实验组,使用两组不同序列在MGC803中抑制PHF5A的表达。采用克隆形成、细胞增殖计数检测细胞增殖情况,采用划痕实验检测细胞体外迁移能力变化。用Western blot检测阴性对照组和实验组中NF-κB P65(核内)、p-IkBα,IkBα,Cyclin D1蛋白表达情况。结果 Western blot和qPCR结果显示胃癌细胞系MGC803、AGS、MKN45中PHF5A的表达量高于胃正常细胞系GES-1,差异有统计学意义。在MGC803细胞中抑制PHF5A的表达后,PHF5A蛋白的表达水平降低。与对照组比较,细胞的增殖和迁移都受到了抑制。同时,实验组细胞NF-κB P65核内表达降低,IκBα磷酸化水平下降,Cyclin D1表达水平下降(P<0.05)。结论 PHF5A在胃癌肿瘤细胞中的表达显示高于正常细胞,可能通过NF-κB信号通路来影响胃癌细胞MGC803的增殖和迁移。

• 单位
  安徽医科大学