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摘要
目的:基于MassARRAY质谱分析技术建立脑胶质瘤6个基因11个位点的突变检测方法。方法:通过文献检索并结合对脑胶质瘤分子病理的研究进展,确定了与临床分级、诊断、及预后密切相关的6个靶基因,对目的基因进行突变位点筛选并确定热点突变。按MassARRAY突变位点标示方法和引物设计固定格式,将基因突变位点进行标注,并利用Agena BioScience在线软件,设计突变位点的正、反向扩增引物和延伸引物。收集40例脑胶质瘤患者的石蜡样本建立检测方法,并采用聚合酶链式反应(PCR)联合一代测序方法进行结果验证。结果:筛选出8对扩增引物和11条延伸引物,通过2组多重PCR扩增延伸及质谱解吸电离技术实现11个位点的基因分型检测。与一代测序法相比灵敏度为100%,特异度为97%。结论:成功建立MassARRAY质谱分析脑胶质瘤6个基因11个位点突变检测方法,与一代测序相比质谱分析法更经济和更节约时间。
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单位首都医科大学; 中心实验室
