猴副流感病毒SV5 PCR检测方法的建立与初步应用

作者：于浩; 蒋虹; 佟巍; 丛喆; 孙敏; 冯育芳; 王卫; 涂新明; 魏强

来源：中国实验动物学报, 2006, (01): 32-35.

DOI：10.3969/j.issn.1005-4847.2006.01.009

• 猴副流感病毒SV5
• 聚合酶链反应
• 巢式PCR
• 检测

目的建立检测SV5的PCR方法并加以初步应用。方法根据GenBank中报道的SV5序列,针对其中的SH基因设计引物进行PCR反应,扩增产物进行测序并用BLAST软件进行同源性比对,同时利用限制性内切酶的酶切反应以证实此PCR反应的特异性。在此基础上设计巢式PCR提高此方法的灵敏度。利用此方法对20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本进行检测。结果利用设计的引物扩增出的序列测序结果证实与报道的SV5SH基因相对位置的序列一致。AccⅢ限制性内切酶可对PCR产物进行特异性酶切。巢式PCR比一次PCR的敏感度有所提高。用此方法检测的20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本结果为阴性。结论初步建立了检测SV5病毒的PCR方法,排除实验室用20份猴肾源细胞培养物和40份血清标本SV5的污染。

• 单位
  中国医学科学院; 中国协和医科大学