狂犬病病毒M蛋白在杆状病毒中的表达、纯化及多克隆抗体的制备Expression and Purification of M Protein of RV in Baculovirus and Preparation of Its Polyclonal Antibody

作者：郑光来; 卢晓冉; 张静远; 陈腾; 王东方; 严妍; 张守峰; 扈荣良ZHENGGuanglai; LU Xiaoran; ZHANG Jingyuan; CHEN Teng; WANG Dongfang; YAN Yan; ZHANG Shoufeng; HU Rongliang

来源：病毒学报, 2016, (04): 472-477.

DOI：10.13242/j.cnki.bingduxuebao.002967

• 狂犬病病毒
• 基质蛋白
• 杆状病毒
• 表达
• 纯化
• 多克隆抗体 Keywords：rabies virus
• matrix protein
• baculovirus
• expression
• purification
• polyclonal antibody

为表达狂犬病病毒（RabiesVirus, RV）基质蛋白（M）蛋白，进而制备多克隆抗体。本研究以狂犬病病毒BD06株RNA为模版，通过RT-PCR扩增M蛋白基因全序列，将其插入质粒pFastbac I中，获取的重组质粒pFastbac I-M，经酶切鉴定后，转化到DH10Bac E.coli 感受态中，以获取重组穿梭质粒Bacmid-M。用lipofectamine2000介导Bacmid-M转染Sf9细胞获取重组杆状病毒AcMNPV-M。用抗His标签的单体、犬抗RV阳性血清及兔抗RV阳性血清通过Western-Blot鉴定重组蛋白的表达及其反应原性。用镍离子亲和层析柱纯化重组蛋白，并免疫...

• 单位
  军事医学科学院军事兽医研究所