摘要
目的探讨自噬在肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导成骨细胞凋亡中的作用。方法将培养液按处理方式的不同分为对照组(不做处理)、TNF-α观察组(加入40μg/L TNF-α)和雷帕霉素(RAP)观察组(加入100nmol/L RAP作用1 h后再加入40μg/L TNF-α)。采用四甲基偶氮噻唑蓝法检测MC3T3-E1成骨细胞增殖活力,流式细胞仪检测MC3T3-E1成骨细胞的凋亡,免疫印迹法检测蛋白表达。结果 (1) MC3T3-E1成骨细胞增殖抑制率、细胞凋亡率:3组比较差异均有统计学意义(P <0.001); RAP观察组、TNF-α观察组均明显高于对照组(P <0.01); TNF-α观察组明显高于RAP观察组(P <0.01)。(2) MC3T3-E1成骨细胞自噬蛋白LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值:RAP观察组显著高于对照组和TNF-α观察组(P <0.01); TNF-α观察组显著低于对照组(P <0.01)。结论自噬在TNF-α诱导MC3T3-E1成骨细胞凋亡中发挥一定作用,增强自噬可以显著降低TNF-α对成骨细胞的损伤。
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