摘要

目的 应用实时荧光定量PCR(real-time PCR)方法检测青藏高原喜马拉雅旱獭血样中布鲁氏菌DNA。方法 2019—2020年收集青海省青藏高原喜马拉雅旱獭全血,进行布鲁氏菌病血清学试验,包括虎红平板凝集试验(RBT)、试管凝集试验(SAT)微量法、胶体金免疫试验(GICA),阳性标本进行real-time PCR检测。分析real-time PCR方法的灵敏度、特异度等指标,评价其结果的准确性。结果 共收集全血1 466份,RBT检出阳性64份,GICA检出阳性28份,SAT检出阳性18份。64份RBT阳性标本进行real-time PCR检测,其中56份标本及阳性对照菌株有特异的荧光扩增曲线,8份标本及阴性对照无特异的扩增曲线。real-time PCR与SAT、GICA比较灵敏度为100%,与RBT比较特异度为99.93%,Kappa值为0.81,高度一致。结论 与传统方法相比,real-time PCR方法具有快速、特异等优点,可以用于青藏高原喜马拉雅旱獭样本检测。