深低温贮存实验犬红细胞适宜甘油浓度的选择

作者：于建; 李丽玮; 李兴龙; 钟宁; 严赛; 杨燕; 严钱勤; 丁在咸; 李志强^*

来源：中国输血杂志, 2020, 33(06): 561-564.

DOI：10.13303/j.cjbt.issn.1004-549x.2020.06.006

• 犬红细胞
• 甘油浓度
• 深低温贮存
• 血液参数

目的探讨深低温贮存实验犬红细胞适宜的甘油浓度。方法 16只比格犬应用戊巴比妥钠(35 mg/kg)静脉麻醉后,颈静脉放血3袋/只(200 mL/袋),共600 mL,分别标记为冰冻前组、20%复方甘油溶液组和40%复方甘油溶液组。取标记为20%、40%复方甘油溶液组各2袋犬血,以无菌导管连接器将血袋与200 mL转移袋相连接,离心移除血袋中血浆与血小板;将20%、40%复方甘油溶液160 mL缓慢滴注入只含红细胞的血袋中,轻振荡混匀,在室温中水平静置后离心挤出上清液,并各分装成5袋(25 mL/袋)并标记,分别置于-80℃冰箱贮存。冰冻前组、20%复方甘油溶液组和40%复方甘油溶液组在冰冻后d1、d35、d60、d90、d180各取红细胞解冻,分别加无菌蒸馏水裂解红细胞后,应用全自动生化仪测定犬红细胞裂解液中血钾(K+)、钠(Na+)、氯(Cl-)、钙(Ca2+)及乳酸脱氢酶(LDH)、葡萄糖(Glu)、游离血红蛋白(FHb)、乳酸(LA)变化;应用酶标仪测定2,3二磷酸甘油酸(2,3-DPG)、衰变加速因子(CD55)、反应性溶血膜抑制物(CD59)、Na+-K+-ATP酶和6-磷酸葡萄糖酶(G-6-PD)变化。结果 20%和40%甘油-80℃保存红细胞后各贮存时间组血K+、Na+、Cl-、Ca2+、LDH、Glu、CD55分别与贮存前相互比较有明显变化(P<0.05);而FHb、LD、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶、G-6-PD、CD59分别相互比较无明显改变(P>0.05)。另外,应用20%甘油比40%甘油行深低温贮存红细胞,对血K+、Na+、Cl-及LDH、Glu影响程度较小,2组间分别相互比较有明显差别(P<0.05),而对血Ca2+影响程度较大(P<0.05);但对FHb、LD、2,3-DPG、Na+-K+-ATP酶、G-6-PD、CD55和CD59的影响2组无明显差别(P>0.05)。结论实验犬红细胞甘油深低温(-80℃)贮存的适宜浓度为20%;贮存期≤180 d反映红细胞质量的相关参数变化相对较小。

• 单位
  上海交通大学