可诱导共刺激分子高表达的T细胞刺激对人主动脉平滑肌细胞基因表达谱的影响

作者：梁梦; 钟志雄^*

来源：热带医学杂志, 2022, 22(05): 612-617+629+741.

• 可诱导共刺激分子
• 主动脉平滑肌细胞
• T细胞
• 基因

目的 可诱导共刺激分子（ICOS）高表达的T细胞（JurKat TICOS）刺激人主动脉平滑肌细胞（HASMC），分析HASMC基因表达水平变化，筛选并确定HASMC表型变化的关键基因。方法 JurKat TICOS细胞、JurKat T细胞（ICOS正常表达的T细胞）分别与HASMC共培养，转录组测序技术（RNA-seq）分析HASMC表达谱，对差异表达基因（P≤0.05、|log2Fold Change|≥1.0）进行聚类分析、基因本体论（GO）功能富集分析、京都基因和基因组百科全书（KEGG）通路富集分析，分析HASMC表型转化相关的信号通路基因变化情况。采用qRT-PCR对部分关键差异表达基因进行验证。结果 JurKat TICOS细胞与HASMC共培养组、JurKat T细胞与HASMC共培养组之间比较发现435个差异基因（P≤0.05，|log2Fold Change|≥1.0），其中375个基因表达上调（86.2%）,60个基因表达下调（13.8%）。GO功能富集结果表明，这些基因参与了细胞活化、细胞粘附、调节免疫效应过程、白细胞迁移、血小板活化、细胞趋化作用、免疫突触的组成；KEGG富集分析结果表明，差异基因参与了Fcγ受体介导的吞噬作用、细胞周期信号通路、细胞粘附分子、T细胞受体信号通路等。将RNA-seq差异基因映射到平滑肌细胞表型转化的相关信号通路上，发现有34个差异基因（P≤0.05，|Fold Change|≥1.5）富集到PI3K/Akt信号通路上。利用qRT-PCR技术对其中10个关键基因进行验证，验证结果与RNA-seq趋势一致。结论 JurKat TICOS细胞刺激HASMC对HASMC基因表达谱具有影响，HASMC表型转化过程中PI3K/Akt信号通路可能发挥着主要的调控作用，为阐明ICOS过表达的T细胞对HASMC的作用提供了实验依据。

• 单位
  赣南医学院第一附属医院; 梅州市人民医院