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摘要
植酸酶是水解植酸及其盐类生成肌醇和磷酸的一类酶的总称。作为一种新型饲料添加剂,植酸酶在动物营养及环境保护等领域具有很大的应用潜力。为了获得高活性的植酸酶app A,首先将app A基因克隆到载体p Fast Bac Dual中,构建转移载体p Fast Bac Dual-polyh-app A;然后转化大肠杆菌Escherichia coli DH10Bac感受态细胞;通过位点特异性转座,将app A基因整合到Bacmid穿梭载体中,构建表达质粒Bacmid:Ac-polyh/app A。最后,通过脂质体将表达质粒转染Sf9昆虫细胞。Western blotting和酶活测定法对app A的表达和活性进行分析,结果表明在昆虫细胞中app A酶表达成功,植酸酶能够被包埋进多角体内部,并具有较好的植酸酶活性,为植酸酶大规模生产和应用提供了可参考利用的技术。
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