结核分枝杆菌分泌蛋白ESAT-6-CFP10的融合表达及纯化

作者：娄培安; 王晓婷; 周艳秋; 章辉; 刘加彬; 李玲; 赵广法; 朱荫昌

来源：热带病与寄生虫学, 2005, (04): 196-200+195.

• 结核分枝杆菌
• 抗原
• 重组
• 酶联免疫吸附测定 Mycobacterium tuberculosis
• Antigen
• Gene Recombiant
• Enzyme- linked immunoab- sorbant assay

目的在原核表达系统融合表达结核分枝杆菌早期分泌性抗原靶ESAT-6和培养滤液蛋白CFP10的融合蛋白(rE6C)并纯化,测定抗原性和特异性。方法用将一个柔性的氨基酸“接头”插入原核表达载体pET32c(﹢)中,构建pET32c(﹢)-linker。PCR法扩增ESAT-6、CFP10基因。将ESAT-6克隆入改建的载体pET32c(﹢)的linker前,CFP10克隆入linker后,构建E6C融合基因,转化大肠杆菌XL1-blue,抽提质粒,酶切鉴定;在大肠杆菌BL21中表达,纯化rE6C蛋白,通过酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测其抗原性和特异性。结果重组质粒pET32c(﹢)-ESAT...

• 单位
  江苏省血吸虫病防治研究所