Mxi1基因敲除小鼠遗传背景的转换研究

作者：吴玲玲; 朱晗玉; 洪权; 高洁; 陈香美

来源：军事医学, 2016, 40(06): 488-511.

• 遗传背景转换
• 微卫星DNA
• FVB/N
• C57BL/6
• 杂交-回交
• 小鼠,基因敲除

目的对FVB/N品系Mxi1基因敲除(knock out,KO)(Mxi1~(-/-))小鼠进行遗传背景转换,为研究疾病发病机制提供更多种类的基因修饰小鼠。方法将FVB/N品系杂合子小鼠(Mxi1+/-)与异性C57BL/6品系野生型(wild type,WT)小鼠(Mxi1+/+)杂交,获得杂合子F1代后将其与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,再选择F2杂合子与C57BL/6品系Mxi1+/+小鼠回交,依此再回交8次后,子代互交。利用鼠尾DNA进行基因型鉴定及微卫星DNA(msDNA)检测,组织信使RNA(mRNA)和组织蛋白检测背景转换效率。结果基因型鉴定为Mxi1-/-的互交子代小鼠msDNA检测结果与WT型C57BL/6小鼠一致,与FVB/N小鼠不同。PCR和Western印迹结果显示,随机选取的任意自交子代纯合子小鼠体内不表达Mxi1的mRNA和蛋白质,成功获得C57BL/6品系Mxi1-/-小鼠。结论通过杂交-回交的方式成功获得的新品系Mxi1-/-小鼠能稳定地将突变基因传递给子代。这一成果为疾病动物模型的建立提供了更多的选择。

• 单位
  肾脏疾病国家重点实验室; 中国人民解放军总医院; 吉林大学; 国家慢性肾病临床医学研究中心