伪结核棒状杆菌感染影响巨噬细胞IL-1α表达、成熟及分泌的机制研究

作者：王晓涵; 田尚全; 邹安龙; 谭静梅; 易文毅; 王芝英; 周作勇^*

来源：微生物学报, 2022, 62(10): 3947-3956.

DOI：10.13343/j.cnki.wsxb.20220102

• 伪结核棒状杆菌
• 巨噬细胞
• IL-1α
• 磷脂酶D
• 钙蛋白酶

【目的】伪结核棒状杆菌(Corynebacterium pseudotuberculosis,Cp)感染动物常引起内脏和体表淋巴结脓肿，以被感染部位炎性细胞因子大量增加为特征。研究Cp感染小鼠巨噬细胞对IL-1α成熟分泌的影响及机制。【方法】采用荧光定量PCR、ELISA和Western blotting等方法，首先检测Cp(ATCC19410、XH02)及其磷脂酶D基因(pld)缺失株(ATCC19410Δpld、XH02Δpld)感染巨噬细胞对IL-1α表达及成熟分泌的影响，进而以Ca2+螯合剂(EDTA、EGTA+Mg2+和BAPTA-AM)、calpain抑制剂(calpain inhibitorⅢ、calpain inhibitorⅣ和EST)处理巨噬细胞，观察对Cp感染介导IL-1α成熟分泌的影响。【结果】Cp感染巨噬细胞后，IL-1αmRNA表达及分泌显著增加，与ATCC19410、XH02感染巨噬细胞相比，ATCC19410Δpld、XH02Δpld感染细胞IL-1α表达及分泌显著下降。Cp感染引起巨噬细胞内Ca2+浓度显著增加，calpain活性增强，而缺失pld的Cp感染巨噬细胞内Ca2+浓度显著下降，calpain活性降低。EDTA、EGTA+Mg2+、BAPTA-AM、calpain inhibitorⅢ、calpain inhibitorⅣ处理Cp感染的巨噬细胞，巨噬细胞的IL-1α表达及分泌显著下降。【结论】Cp感染可激活巨噬细胞IL-1α表达和成熟分泌，磷脂酶D参与Cp感染巨噬细胞介导的IL-1α成熟分泌。Cp感染巨噬细胞介导IL-1α成熟与分泌与胞内Ca2+浓度增加、激活钙蛋白酶有关。

• 单位
  西南大学