摘要
目的 研究大鼠心肌缺血/再灌注(myocardial ischemia/reperfusion,MI/R)损伤后心肌细胞的铁代谢及从肝治心组方干预对铁死亡的调节作用。方法选择体外培养的大鼠H9c2心肌细胞,并采用氧糖剥夺/复灌(oxygen glucose deprivation/reperfusion,OGD/R)法建立体外MI/R模型。将细胞分为正常组、模型组、中药组、抑制剂组、激动剂组、联合组、空白血清组。除正常组外,其余各组均予以OGD/R诱导损伤,在复灌时分别给予完全培养基、含15%含药血清的高糖DMEM培养基、含铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1)(0.5μmol/L)的完全培养基、含爱拉斯汀(Erastin)(10μmol/L)的完全培养基、含Erastin(10μmol/L)的15%含药血清培养基、含15%空白血清的高糖DMEM培养基。采用CCK-8检测细胞存活率,TMRE荧光探针检测线粒体膜电位,Ferro Orange检测细胞内Fe2+水平,DCFH-DA荧光探针检测活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。结果 与正常组比较,模型组与空白血清组细胞存活率及线粒体膜电位显著下降(P<0.01),Fe2+及ROS水平显著升高(P<0.01)。模型组与空白血清组线粒体膜电位、Fe2+水平差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组比较,中药组及抑制剂组细胞存活率及线粒体膜电位显著升高(P<0.01),Fe2+及ROS水平显著降低(P<0.01)。中药组与抑制剂组线粒体膜电位、Fe2+及ROS水平差异无统计学意义(P>0.05)。与模型组相比,激动剂组细胞存活率及线粒体膜电位显著下降(P<0.01),Fe2+及ROS水平显著升高(P<0.01)。与激动剂组相比,联合组细胞存活率及线粒体膜电位显著升高(P<0.01),Fe2+及ROS水平显著降低(P<0.01)。结论 从肝治心组方可以减少MI/R损伤,其机制可能与调节心肌细胞铁代谢、抑制铁死亡有关。
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单位湖南中医药大学; 湖南中医药大学第一附属医院