消瘀止痛合剂联合骨髓间充质干细胞对股骨颈骨折兔骨愈合的影响及机制

作者：韦志豪; 袁振中; 胡耶芳; 陈炜坚; 钟健; 郭诗雯; 唐刚健^*

来源：现代中西医结合杂志, 2023, 32(20): 2781-2797.

• 股骨颈骨折
• 骨愈合
• 消瘀止痛合剂
• 骨髓间充质干细胞
• 转录组测序

目的 研究消瘀止痛合剂联合骨髓间充质干细胞(BMSCs)对股骨颈骨折兔骨愈合的影响，并基于转录组测序技术探讨其可能作用机制。方法 取36只新西兰白兔建立股骨颈骨折模型，将造模成功白兔随机分为空白组、BMSCs组、消瘀止痛合剂组和消瘀止痛合剂+BMSCs组，每组9只。BMSCs组、消瘀止痛合剂+BMSCs组于造模后第1天在骨折端周围注射1 mL大白兔BMSCs悬液(BMSCs 5×106个/mL),其他组局部注射等剂量DMEM。于术后第2天开始，消瘀止痛合剂组及消瘀止痛合剂+BMSCs组给予消瘀止痛合剂4.2 mL/kg灌胃，空白组、BMSCs组给予等量生理盐水灌胃，均1次/d。连续干预4周后，ELISA法检测血清中碱性磷酸酶(ALP)及骨钙素(OCN)水平；处死白兔后取造模侧股骨，观察股骨组织变化，HE染色观察骨组织病理学形态，实时荧光定量PCR法检测股骨组织中ALP及OCN mRNA表达情况；转录组测序及生物信息学分析空白组与消瘀止痛合剂+BMSCs组差异表达基因情况。结果 消瘀止痛合剂+BMSCs组血清ALP、OCN水平及骨组织中ALP、OCN mRNA相对表达量均明显高于空白组及BMSCs组(P均<0.05),消瘀止痛合剂组血清ALP、OCN水平及骨组织中ALP、OCN mRNA相对表达量均明显高于空白组(P均<0.05)。消瘀止痛合剂组及消瘀止痛合剂+BMSCs组骨折端及周围有大量骨痂生成，可见明显凸起，伴肥大增生；HE染色显示消瘀止痛合剂+BMSCs组骨小梁宽度、骨小梁密集程度及钙化程度均优于其余3组。转录组测序结果分析显示，消瘀止痛合剂联合BMSCs治疗股骨颈骨折主要涉及钙离子信号通路、Ras信号通路、破骨细胞分化、趋化因子信号通路、Toll样受体信号通路等，可能与调控Toll样受体4(TLR4)、TYRO蛋白酪氨酸激酶结合蛋白(TYROBP)、集落刺激因子-1受体(CSF1R)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等基因有关。结论 消瘀止痛合剂联合BMSCs可促进新西兰白兔股骨颈骨折愈合，其机制可能与调控破骨细胞分化和炎症相关信号通路及基因有关。

• 单位
  桂林市中医医院; 广西中医药大学