DNMT1在SD大鼠心肌成纤维细胞增殖中的作用

作者：丁季飞; 陶辉; 石开虎^*; 徐盛松

来源：中国药理学通报, 2020, 36(08): 1129-1133.

• DNMT1
• 心肌纤维化
• 心肌成纤维细胞
• 增殖
• α-SMA
• Col1A1

目的探讨DNA甲基化转移酶1(DNA methyltransferase 1,DNMT1)在SD大鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖中的作用。方法取1～3 d的SD大鼠的心脏,剪碎消化后提取CFs,在显微镜下观察鉴定形态。细胞贴壁生长后分别向各组细胞转染siDNMT1(小干扰DNMT1)及阴性对照组(NC)24～48 h,运用qRT-PCR方法检测DNMT1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原前胶原A1(Col1A1)的mRNA表达量;CCK-8法检测细胞增殖活性;Western blot检测DNMT1、α-SMA和Col1A1的蛋白表达量;细胞周期实验检测细胞周期分布情况。结果 CFs中siDNMT1组中DNMT1表达下调。Western blot及qRT-PCR结果显示,α-SMA和Col1A1在siDNMT1组中的表达明显下降。CFs转染siDNMT1后培养48 h,CFs活力明显下降。细胞周期实验表明CFs转染siDNMT1 48 h后,与NC组相比,G0和G1期细胞比例升高明显,细胞周期被阻滞明显。结论DNMT1表达下调能抑制CFs的增殖,提示DNMT1可能是心肌纤维化发生发展中的关键调节点。

• 单位
  安徽医科大学第二附属医院