内切菊粉酶基因在毕赤酵母中的高水平表达研究

作者：冯碧薇; 张赓; 李悦; 袁汉英; 吕红

来源：复旦学报(自然科学版), 2012, (01): 99-104.

DOI：10.15943/j.cnki.fdxb-jns.2012.01.019

• 内切菊粉酶
• 毕赤酵母
• 酶活力 endo-inulinase
• Pichia pastoris
• enzyme activity

低聚果糖(Fructooligosaccharides,FOS)具有改善胃肠道环境、刺激和加强机体免疫反应、抑制肠道特定肿瘤的发生等生物活性.内切菊粉酶能够水解菊粉获得低聚果糖.为了实现内切菊粉酶的高表达,从无花果曲霉(Aspergillus ficuum ATCC16882)中克隆了内切菊粉酶编码基因INU2,并实现了在毕赤氏酵母中的重组分泌表达,摇瓶表达的酶活力为570.4U/mL.去除内切菊粉酶的内源性信号肽序列后,其重组表达水平显著提高,摇瓶表达的酶活力为1013.8U/mL,提高幅度77.7%.TLC分析表明:毕赤酵母重组表达的内切菊粉酶(不含内源性信号肽序列)能将2%长链菊粉水解为...

• 单位
  复旦大学; 生命科学学院; 遗传工程国家重点实验室